




β-内酰胺酶测量分析仪4种途径
(1)产生β-内酰胺酶使β-内酰胺类***开环失活,这是产生耐药的主要原因。目前发现的β-内酰胺酶已超过300种,它通过与β-内酰胺环上的羰基共价结合,β内酰胺酶测量多少钱,水解酰胺键从而使β-内酰胺类***开环而失活。
(2)改变***与青结合蛋白( penicllin binding proteins,牛奶β内酰胺酶测量多少钱,PBPs) 的亲和力。当β-内酰胺类***与PBP结合后,PBP就会失去酶活性,使***细胞壁的形成部位破损而引起溶菌,反之,则,成为耐药菌。PBP ***的变异,使β-内酰胺类***无法与之结合或结合能力降低,这是形成耐药的根本原因。
(3) 细胞膜和细胞壁的结构发生改变,使难以进入***内。如生物膜的形成。
(4)***体内的能力依赖性主动转运机制,乳品β内酰胺酶测量多少钱,将已进入***内的***泵出体外,也可导致耐药性。
β-内酰胺酶测量分析仪碘量法
[原理]β-内酰胺酶能裂解青霉的β-内酰胺环形成青霉唑酸,它与淀粉竞争游离碘,***了碘和淀粉的兰色复合物,使兰色变为无色。
[方法] ①将0.25克.青霉溶于41.7mlPH6.0 的磷酸盐缓冲液中,使其浓度成6000ug/ml。 取0.1ml
于一小试管中。
②将培养18-24小时的***在含青霉试管内制成浓厚菌悬液(109/ml)。
③在37"C水浴中放置30分钟,不时摇动,使酶能***青霉。
④加入1%可溶性淀粉溶液0.5ml,摇匀。
⑤加入碘液 0.02 ml。
⑥在 37°C水浴中放置10分钟,观察结果。
[结果]在10分钟内能使兰色完全消退的菌株为β-内酰胺酶阳性,不消退者为阴性。
[注意事项]
①由于青霉很容易分解,因而用于实验的青霉应新鲜配制。
②淀粉也新鲜配制,在100ml蒸馏水中加入1克可溶性淀粉,放到开水中水浴直到淀粉溶解。
③实验应 按照步骤操作,如果碘加得过早,酶反应就会停止,产生假阴性结果。
④每次试验用阳性和阴性对照。
β-内酰胺酶测量分析仪产色头胞菌素法
[原理]产色头胞菌素如头胞硝(nitrocefin)的β -内酰胺环能被β -内酰胺酶所***,使其颜色由浅***变为粉红色,以此来测定***的产酶情况。
[方法] 将头胞硝( nitrocefin)纸片置于干净的平皿内,乳制品β内酰胺酶测量多少钱,用无菌的牙签或接种环挑取***菌落涂于纸片上,观察纸片有无颜色变化。
[结果] 纸片涂抹处如颜色由浅***变成粉红色,表示该菌产生β-内酰胺酶,如颜色不变,表示***不产生β -内酰胺酶。检测 β -内酰胺酶方法中,生物学方法是古老的方法,由于特异性差、灵敏度低,现在基本上很少被采用,头胞硝(nitrocefin) 主要检测奈瑟氏菌、嗜血菌、莫拉氏菌(布拉汉氏菌)、葡萄球,结果可靠。
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