细胞冷冻保存，进口程序降温仪，1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，进口全自动程序降温仪，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
在细胞冻存的过程中，程序胚胎冷冻仪进口，液态水转化为冰，细胞代谢停止。同时，水分也随之散失，导致细胞内盐、代谢物浓度改变，进而造成渗透压失衡，直接影响冻存细胞的复苏。同时，冷冻速率太快或太慢，容易导致细胞内水分丧失或形成大冰晶，进口自动化程序降温仪，都不利于细胞存活。通过使用程控降温仪，选择合适的冻存液，设定合适的升降温速率，可有效地克服上述不利因素。实践证明，（经温度补尝后）每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。
程序降温仪主要组成部分：整套程序降温仪有3大部件组成，依靠数据线，链接软管等组成一整套智能程序控温设备，这样的一整套设备我们称之为程序降温仪，也叫程序控制冷冻装置。电脑系统本仪器以电脑作为主控设备。 电脑系统包括主机、彩色显示器、键盘和有关应用软件。不锈钢主机箱箱体的内外壁都是不锈钢材料。箱的前部是具有良好保温性能的冷冻室。标配室内安装了温度传感器和搅匀循环风扇。还配有样品架屉。冷冻中被冻样品即放置在样品架上。
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