





细胞冷冻保存,1. 材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法:(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,进口自动化程序降温仪,造成细胞大量,进口程序降温仪厂家,亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温:利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1~-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。

本仪器由以下三部分构成:1,上位机控制系统: 自带,冷冻时只要运行有关软件即可。2.标准冷冻箱: 内外全不锈刚结构.冷冻容机不小于200*200*200毫米.可同时容纳冷冻管160个或血袋8个.可定制不同容积以及立式卧式选择。。3.液氮罐及液氮加压器: 液氮加压器安装在30立升的液氮罐上,使罐内自增压,调节阀保持压力稳定。运行显示仪器实时工作状态﹑同时显示温度数据和曲线。

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