硅胶柱层析惯用方法
1.称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是/乙酯/体系，就用拌；如果洗脱剂是/醇体系，树脂柱供应，就用拌。如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酯/，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用钠久置干燥。用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用体系过柱。
层析柱的直径大小不影响分离度
层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，树脂柱价格， 直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，树脂柱，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。
层析柱的应用领域介绍
干法装柱与湿法装柱刚好相反的是，它是将干燥的吸附剂从柱子上端直接加入到一个空的柱子中，然后用油泵抽柱子底部，相当于减压过柱，直到柱子变得很结实， 再用淋洗剂“走柱子” 。
干法装柱的一个缺点就是在装入洗脱剂后，由于溶剂和固定相之间的吸附放热，树脂柱厂家，所以柱子容易变花，影响分离效果。解决的方法是：
（1）固定相一定要添加结实；
（2）一定要用较多的溶剂“走柱子”，直到柱子的下端不再发烫，***到室温后再撤去压力。无论使用哪种方法装柱，后都要求所装的柱子结实、匀称、无气泡。
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