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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
***配制区(Ⅰ区):洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管。
DNA模板添加区(Ⅱ区):压力比Ⅰ区低,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持负压,使得内部空气不外泄,PCR实验室,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。操作时压力遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。
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PCR实验室的设计规范
区域气压调节
***准备区和样品处理区宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果;核酸扩增区和产物分析区应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染***与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。PCR实验室缓冲区内可设置正压,使得室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。
各区域通过气压调节,使得在整个PCR实验过程中,***和样品免受气溶胶污染,并降低扩增产物对操作人员和环境的污染。另外各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人员流动与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
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PCR实验室的设计规范
1、区域布局合理
PCR扩增试验室原则上分为4个***的工作区,即***准备区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区。为避免交叉污染,必须严格按照单一方向进入每个工作区,每个实验区之间的***和样品转移应通过转移窗口进行。
2、标准的三区分隔
PCR过程可分为***制备、标本制备和PCR扩增检测三个***的实验区,整个实验区设置有一个整体缓冲走廊,每个***的实验区都设有一个缓冲区。
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