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PCR实验室设计建设标准规范
各区域的功能与设备
***制备区主要为扩增***的准备,PCR实验室工程,分装盒保存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、紫外灯。
样品制备区主要是样品的混样和测试样品的制备。其主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水槽、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。操作台是否使用生物安全柜、净化工作台,或工作台,要根据样品的性质和制备要求来决定,如疾控中心、临床***实验室一般选择生物安全柜,植物、检疫等选择柜。
扩散区为pcr扩增反应系统的制备和模板的添加、核酸扩增。在生物安全柜(超净台)内进行加样,超净台气流方向宜选用垂直式。冰箱,生物安全柜,离心加样装置,废物容器,紫外灯等。
扩增产物分析区为扩增产物的分析区域。如果只使用全自动扩增检测仪,可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。本区域所使用的仪器设备有、、加样器和水浴箱等。
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PCR实验室相关内容
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PCR实验室各区功能及主要设备:***准备区:主要进行***的制备,分装和主反应混合液的制备。***盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。
扩增区:主要进行DNA扩增项目。已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自***准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
***配制区(Ⅰ区):洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管。
DNA模板添加区(Ⅱ区):压力比Ⅰ区低,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持负压,使得内部空气不外泄,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。操作时压力遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。
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