胞胞外囊泡zet***iew检测-武汉科锐诺

iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素***来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些***由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可保证iTRAQ***标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一iTRAQ***，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。

外泌体可通过多种小分子进行修饰，胞胞外囊泡zet***iew检测，因此逐渐成为递送治1疗药1物的有效载体。研究发现，GRP78 在索拉菲尼耐药***细胞中，相对于索拉菲尼敏感***细胞中显著过表达，因此，可能是 HCC 治1疗的潜在靶点。

在这项研究中，锦州***院赵亮课题组通过修饰 BM-MSCs 以表达外泌体 siGRP78，证明了 siGRP78 修饰的外泌体与索拉1非尼联合能够靶向肝细胞***细胞中的 GRP78 并***其生长和体外***细胞的侵袭。此外，siGRP78 修饰外泌体与索拉1非尼联合也***体内***细胞的生长和转移。证明了 siGRP78 修饰的外泌体可以使索拉1非尼耐药的***细胞对索拉1非尼敏感并逆转耐药性。

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国际细胞外囊泡学会(ISEV) 在2014年的提议，对于提取获得的外泌体，需要通过以下手段进行确认：

      双层囊膜结构是外泌体重要标志之一，但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (Tran***ission electron microscope， TEM) 分辨率可达0.1 ~ 0.2 nm，可将被观察物体放大至数百万倍，非常适合进行外泌体双层囊膜超微结构观测。

      表观生物技术团队拥有丰富的外泌体电镜样本处理与鉴定经验，可为客户提供高质量外泌体TEM检测服务，获得样本中外泌体典型形态特征图片 (如图一)。

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