层析的原理离子交换层析 离子交换层析是在以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂是由基质、电荷基团和反离子构成的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。如果样品与硅胶的吸附比较强的话 ，就不容易流出 ，这时可以采用氧化铝作固定相。柱层析后的淋洗液 ，树脂柱多少钱，由于使用了较多的溶剂 ，必须进行浓缩 ，如果待测物具有一定的挥发性 ，使用常压挥发溶剂 ，否则易导致检测结果偏低。
层析柱的直径大小不影响分离度
层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，树脂柱生产厂家，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，树脂柱，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。
柱层析技术
柱子规格的选择
市场上有各种规格的柱层析分离柱。柱子长了 ，相应的塔板数就高 ，分离就好。目前市场上的柱子 ，其径高比一般在1: 5～10范围 ，在实际使用时 ，填料量一般是样品量的 30～40倍 ，具体的选择要根据样品的性质和含量进行具体分析。如果所需组分和杂质的分离度较大 ，就可以减少填料量 ，使用内径相对较小的柱子 (如 2 cm × 20 cm的柱子 ) ;如果 Rf相差不到 0.1，就要加大柱子 ，增加填料量 ，比如用 3 cm内径的柱子。
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