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PCR实验室各区功能及主要设备:***准备区:主要进行***的制备,分装和主反应混合液的制备。***盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。
扩增区:主要进行DNA扩增项目。已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自***准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,PCR实验室改造,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。
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PCR实验室又称为***扩增实验室。PCR技术是实验结果的重要来源,根据这种分子生物学技术,可以扩增出特定的DNA片段,并利用***含量来探索患者体内的病毒含量,精度可达到纳米级。该方法灵敏性强、特异性高、快捷、对样品要求低,已广泛应用于***的临床诊断和防疫检测部门的疫病诊断。PCR实验室主要包括***准备区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区等四个区域。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
***配制区(Ⅰ区):洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管。
DNA模板添加区(Ⅱ区):压力比Ⅰ区低,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持负压,使得内部空气不外泄,PCR实验室设计,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。操作时压力遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。
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