




蛋白层析柱操作流程
1.吸附:吸附操作自上而下(或自下而上)通液,可采用不同流速,大孔树脂柱价格,以选取适宜条件。流出液每隔一段时间取样检测,达泄漏点停止吸附,或多柱串联达饱和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物,该过程应控制料液的速度及吸附量,大孔树脂应完全浸泡在料液里,以提高吸附效果和运行稳定性。
2.解吸和再生:解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸剂,大孔树脂柱生产商,单柱吸附时,解吸与吸附操作对流为佳。解吸剂沸点要低以便回收处理。
层析柱的操作方法介绍
层析柱再生、平衡
有效成分经TLC检识全部流出后,用纯5000ML再生,一(5:95)平衡后,可再次上样,反复使用(使用次数随原料不同而异,一般可连续使用2—6个月以上)。
重结晶
冬凌草甲素结晶析出完全后,减压过滤,然后用少量洗涤(洗涤液保留,作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置,结晶再次析出,待结晶完全后,抽滤,用少量乙*洗涤,将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中,35度真空干燥至恒重。密封于瓶中,置干燥器中保存。
薄层层析分析
取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上,以*仿一(8:2)为展开剂进行展开,5% 香草醛乙醇液显色,于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下,冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值,大孔树脂柱,并呈现出同样的蓝绿点,在制备的冬凌草甲素样品中,没有杂质斑痕。
事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基在外,大孔树脂柱供应,很容易是样品分解,特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝有碱性、酸性的,选择余地比较大,但比硅胶要贵些。听说有个方法,就是用石英做柱子,然后用HF254做固定相,这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了,没有验证过。选择吸附剂:200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。推荐硅胶量是样品量的30-40倍,具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分Rf在0.2-0.4,杂质相差0.1以上),就可以少用硅胶。用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话,就不容易流出。这样就会发生,后面的点先出,而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。
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