




单细胞测序(英语:Single cell sequencing)采取优化的下一代DNA测序技术(NGS)检测单细胞的序列,可以获得特定微环境下的细胞序列差异以方便研究其功能差异等。对个体细胞的DNA测序可以帮助我们了解例如在中的小范围细胞的变异;对其进行RNA测序可以帮助我们了解和鉴别不同的细胞类型与其表现的***,对研究发育生物学等有较大裨益。
分离单细胞
在全***组扩增和测序前,有很多方法可以分离细胞个体,其中流式细胞术(FACS)较为常用。个体细胞可以用显微操作来收集,这样较为快捷而且成本较低,但是比较有技术难度,而且显微镜下对细胞的错误分类容易影响实验结果。激光捕获显微切割技术(LCM)亦可以用来收集单细胞。但是尽管激光捕获显微切割可以保留样本细胞在***中的空间位置,但是捕获单细胞的时候容易连带周围细胞的物质。高通量的细胞个体分离还可以使用微流控技术。微流控技术和流式细胞技术都能准确而自动地分离无偏样本。但是,两种方法都要求首先将细胞从其为环境中脱离,PCR,因此可能在RNA表达分析中造成对转录数据的干扰。

miRNA测序
microRNA(miRNA)是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA,是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(双链)但是和siRNA密切相关。microRNA通过和靶***mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或***mRNA的翻译,安徽pcr,从而在转录后水平调控蛋白表达(新发现miRNA也能在转录水平调控***表达)。miRNA在物种进化中相当保守,在动物、植物和***等中发现的miRNA表达均有严格的***特异性和时序性。miRNA在细胞生长和发育过程中起多种作用,包括调控发育、分化、凋亡和增殖等。
目前研究miRNA的方法主要是realtime-PCR、生物芯片技术以及第二代测序技术。基于第二代测序技术的miRNA测序,可以一次获得数百万条miRNA序列,能够快速鉴定出不同***、不同发育阶段、不同***状态下已知和未知的miRNA及其表达差异,为研究miRNA对细胞进程的作用及其生物学影响提供了有力工具。
单细胞RNA测序
单细胞RNA测序也称scRNA-Seq。通常而言,一般的***细胞RNA-seq实验会产生1000万个读数,实时定量pcr,如果一个***的频率超过50RPKM,即每百万读数中每千个碱基中超过50个,这一***即被认为有表达。泊松分布下,1kb长的***有超过500个读数和4%的小变异系数,即CV值;哺乳动物细胞通产含有200,pcr引物设计,000个mRNA,因此至少要用50个单细胞一起才能到达小CV值;考虑到逆转录的效率和环境干扰等因素,为得到准确的表达和细胞种类的识别,需要使用的细胞数量实际要更多。

安徽pcr-英瀚斯生物科技公司-pcr引物设计由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司是一家从事“***病理,细胞生物,分子生物学平台,动物模型科研外包服务”的公司。自成立以来,我们坚持以“诚信为本,稳健经营”的方针,勇于参与市场的良性竞争,使“英瀚斯”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上,用户至上”的原则,使英瀚斯在技术合作中赢得了客户的信任,树立了良好的企业形象。 特别说明:本信息的图片和资料仅供参考,欢迎联系我们索取准确的资料,谢谢!