




层析柱规格介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。
此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,树脂柱生产厂家,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。
蛋白层析柱操作流程
1.吸附:吸附操作自上而下(或自下而上)通液,可采用不同流速,以选取适宜条件。流出液每隔一段时间取样检测,达泄漏点停止吸附,或多柱串联达饱和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物,该过程应控制料液的速度及吸附量,大孔树脂应完全浸泡在料液里,以提高吸附效果和运行稳定性。
2.解吸和再生:解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸剂,单柱吸附时,解吸与吸附操作对流为佳。解吸剂沸点要低以便回收处理。
柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。常见的例子是:在柱层析时,由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀(没有填严实),树脂柱生产商,使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花,树脂柱价格,导致分离效果不好。更常见的例子是:层析柱虽然装得不错,哈尔滨树脂柱,但是由于淋洗剂选择不恰当,结果导致几十毫克产品,用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。分离同样的东西,熟手可能只需要半个小时,而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。由此可见,这两项技术掌握与否,对于提高工作效率,减轻工作量,减少的使用,从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
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