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硅胶柱层析惯用方法

1.称量。200-300目硅胶，阴阳树脂柱生产商，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。

2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是/乙酯/体系，就用拌；如果洗脱剂是/醇体系，就用拌。如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酯/，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用钠久置干燥。用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，阴阳树脂柱生产厂家，不能用体系过柱。

硅胶柱层析原理

硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。

硅胶柱层析流动相

极性小的用：系统；极性较大的用：系统；极性大的用：水：：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸

事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧常用吸附剂的种类：氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙（镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。几种常见吸附剂的特性（1)氧化铝：市售层析用氧化铝有碱性、酸性2类，阴阳树脂柱供应，粒度规格大多为100-150目。碱性氧化铝（pH9—10)：适用于碱性物质（如胺、)和对酸敏感的样品（如缩醛、糖苷等)，阴阳树脂柱，也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、***A和K等的***等不良副反应。所以，这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。酸性氧化铝（pH3.5—4.5)：适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等以及色素和醛类化合物的分离。中性氧化铝（pH7—7.5)：适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离，也可以用来分离弱的有机酸和碱等。