细胞冷冻保存，1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，程序降温仪器厂家，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
程序降温仪是细胞移植、细胞或***的超低温保存中不可缺少的仪器，是进行细胞学研究的必需工具，在脊髓移植、移植***中起着重要的作用。它以液态氮为制冷剂，自动化程序降温仪，利用液氮挥发时快速降温的特性，通过微机程序控制液氮的挥发量，将挥发室内的温度从常温快速降至-90℃或更低温度，为脊髓、移植等***材料的储备和异地开展提供了便利条件。
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