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装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积（），装上蓄液球，打开柱下活塞，阴阳树脂柱生产厂家，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用（）将其冲入柱中。

压实。沉降完成后，加入更多的，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，阴阳树脂柱，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。

过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。

检测。要更多地使用喷显剂，阴阳树脂柱供应，如果仅用紫外灯，阴阳树脂柱价格，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。

送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝胶柱，作为送谱前的后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。

柱层析技术

柱层析操作方法的选择

目前 ，柱色谱分离的操作方式 ，主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是简单的分离模式方便、简单 ，但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ，但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ，并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ，以及有些易分解的化合物也难以得到 ，而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。加压分离可以加快淋洗剂的流动速度 ，缩短样品的洗脱时间 ，是一种比较好的方法 ，与常压柱类似 ，只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。压力的提供可以是压缩空气 ，双连球或者小气泵等。

层析的原理

聚酰胺薄膜层析 聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。