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层析柱是凝胶层析技术中的主体，大孔树脂柱，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，大孔树脂柱供应，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，为分离不同组分，大孔树脂柱多少钱，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。

柱层析技术上样用少量的溶剂溶解样品加样 ，加完后将底端的活塞打开 ，待溶剂层下降至石英砂面时 ，再加少量的低极性溶剂 ，然后再打开活塞 ，如此两三次 ，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂 ，一开始不要加压 ，等溶解样品的溶剂和样品层有一段距离 (2～4 cm) ，再加压 ，这样避免了溶剂 (如等 )夹带样品快速下行。很多样品在上柱前粘性较大 ，上样后在柱上又会析出 ，这一般都是比较大量的样品才会出现 ，是因为填料对样品的吸附饱和所致。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱 ，大孔树脂柱价格，这样就必须用干法上柱了。

事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基在外，很容易是样品分解，特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝有碱性、酸性的，选择余地比较大，但比硅胶要贵些。听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，没有验证过。选择吸附剂：200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。推荐硅胶量是样品量的30-40倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分Rf在0.2-0.4，杂质相差0.1以上)，就可以少用硅胶。用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话，就不容易流出。这样就会发生，后面的点先出，而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。