




蛋白层析柱操作流程
操作流程一般为:预处理、逆流洗柱、水洗、吸附、解吸和再生
1.预处理:在吸附树脂的生产过程中,一般采用的是工业级原料,产品没有经过进一步纯化处理,树脂内部残留少量单体,所以在使用之前,需用水溶性溶剂对其浸泡处理,然后用去离子水通过树脂层,置换出水溶性溶剂离子方可投入使用。
2.逆流洗柱:用水洗出去水离子及破碎填料,大孔树脂柱供应,树脂装入后,用蒸馏水反洗树脂层,直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止。再依次用酸碱等浸泡、冲洗树脂层,至出水呈中性为止。
3.水洗:水洗的主要目的是除去所附着的渣滓。
中压层析柱的吸附层析原理分析介绍
中压层析柱是利用生物分子间所具有纯化技术,它是利用生物分子间存在的特异性相互作用,通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,大孔树脂柱价格,对另一个分子进行分离纯化。
中压层析柱的吸附层析原理:
1、吸附柱层析
吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。
2、薄层层析
薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相,以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层,然后按纸层析操作进行展层。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。这里要指出的一点是:TLC的作用除了跟踪反应进程,大孔树脂柱生产厂家,检测***和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,大孔树脂柱,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。
接下来谈TLC,需要切记的是:
、某种样品在这种展开剂中只显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时,多尝试几种比例不同,成分不同的展开剂。展开剂的极性太小,点分不开,极性太大,也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右
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