层析填料的类型
在柱层析中，移动相从加入试料的一端展开到达另一端后，层析柱填料，继续展开使各成分和移动相一起向柱外分别溶出，这就是广泛使用的所谓洗提层析（elution chromatography）。层析根据固定相与溶质（试料）间亲和力的差异分为吸附型、分配型、离子交换型（离子交换层析）等三种类型。但这并不是很严格的，有时常见到其中间类型。此外，层析柱填料价格，近来也应用亲和层析，即将与基质类似的化合物（通常为共价键）结合到固定相上，再利用其特异的亲和性沉淀与其对应的特定的酶或蛋白质。
气相色谱法(GC)是在柱层析基本上发展
壮大下去的一种新式仪器设备方式 ，是色谱发展趋势中为完善的技术性。它以稀有气体为流动性相，利用经获取、提纯、浓缩后的农yao药(Ops)引入气相色谱柱，提温汽化后，不一样的Ops在稳固看中分离出来，经不一样的探测器检验扫勾画出气相色谱图，根据保存期来定性，根据峰或峰总面积与标曲对比来定量，具备即定性又定量。
抗l体的层析分离步骤基本
都可以采用标准化的三步曲：步用Protein A介质进行抗l体捕获和浓缩；第二步用离子交换进行中间纯化以去除多聚体，宿主蛋白等杂质；第三步是精纯去除剩余DNA，Endotoxin，Protein A 等微量杂质。在这三步抗l体的分离纯化过程中，步的Protein A亲和捕获占据分离纯化成本80%以上，也是下游分离纯化的瓶颈所在。亲和层析之所以成本高的主要原因：首先是Protein A 价格昂贵，其价格是普通层析介质十几倍；第二，层析柱填料哪家好，Protein A使用寿命短，一般离子交换填料使用寿命多达1000次，而亲和填料寿命通常在100-200次；第三，Protein A 用于抗l体的捕获和浓缩，需要处理大体积的发酵液，而亲和步骤载量往往又低于阴阳离子交换层析，层析柱填料多少钱，使得亲和层析介质使用量比中间纯化或精纯的要多得多。因此，要降低抗l体的生产成本，解决抗l体的生产瓶颈关键在于改进步Protein A 亲和捕获。
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