树脂柱生产厂家-龙鼎世纪(在线咨询)-河北树脂柱厂家

层析柱的操作方法介绍

1.吸附剂的处理及柱子装填

将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，树脂柱厂家供应，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5：95)比例泵入溶剂，至溶剂流出止。

2.上样

将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解，泵入中压柱柱头，然后泵入1000RID。

3.洗脱

以一定比例的一为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC检识展开剂一*仿(2：8)，显色剂5%香草醛乙醇液

至洗脱完全，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。

柱层析技术

装柱

柱层析色谱柱的填装主要有湿法和干法两种 ，湿法省事 ，树脂柱厂家现货，一般用淋洗剂溶解样品 ，也可以用、等 ，河北树脂柱厂家，但溶剂越少越好 ，不然溶剂就成了淋洗剂了。柱子底端的活塞一定不要涂润滑剂 ，否则会被淋洗剂带到淋洗液中 ，可以采用聚四氟乙烯材料的阀门。干法和湿法装柱没什么实质性差别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该有适度的紧密(太密了淋洗剂流速太慢 ) ，并且一定要均匀 ，不然样品就会从一侧斜着流动。同时柱中不能有大气泡 ，大多数情况下有些小气泡没太大的影响 ，因为只要加压气泡就可消失。但是柱子更忌讳的是开裂 ，开裂会影响分离效果 ，甚至报废。

层析的原理

聚酰胺薄膜层析 聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。