




透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边.集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和调亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。
结果评判:调亡细胞体积变小,细胞质浓缩。调亡I期( pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象( c***itati)的空泡结构; IIa 期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生调亡小体。
自噬流检测
自噬是调节真核细鹏生长、和能量代谢的重要生物学机制。细胞自噬行使其生物学功能的前提是自噬流的话化。大量证据表明自噬流受损与多种慢性炎性***,特别是、***退行性***及***纤维化的发病密切相关,目前对于自噬液的检别是自噬与其相关***研究领域的热点。由于自噬流是一个曲多个步骤组成的动态过程。因此往需要精细的突验才能准确判断自啦流状态。
4. 各种细胞对冻存速度的要求也不一样;上皮细胞和成纤维细胞耐受性可能大些,-2~-3℃/ 分钟合适;胚胎细胞耐受性较小,不宜太快。总之在一开始时,下降速度不能超过-10℃/ 分钟。
5. 用什么防护剂合适和用量多大,要依细胞而定,初代培养细胞用 DMSO 较好,细胞实验外包选哪家,一般细胞可用甘油;用量以较小为好。有人认为肤上皮细胞贮存在 20%-30% 甘油中很好。
6. 原则上细胞在液氮中可贮存多年,细胞实验外包费用,但为妥善起见,细胞实验,冻存一年后,应再复苏培养一次,然后再继续冻存。
7. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免
8. 注意自身的安全,对于来自人源性或病毒的细胞株应特别小心。操作过程中,细胞实验外包哪家好,应避免引起气溶胶的产生,小心***性***例如 DMSO,并避免尖锐物品伤人等。

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