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柱层析技术上样用少量的溶剂溶解样品加样 ，加完后将底端的活塞打开 ，待溶剂层下降至石英砂面时 ，再加少量的低极性溶剂 ，然后再打开活塞 ，如此两三次 ，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂 ，一开始不要加压 ，等溶解样品的溶剂和样品层有一段距离 (2～4 cm) ，再加压 ，这样避免了溶剂 (如等 )夹带样品快速下行。很多样品在上柱前粘性较大 ，上样后在柱上又会析出 ，这一般都是比较大量的样品才会出现 ，是因为填料对样品的吸附饱和所致。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱 ，这样就必须用干法上柱了。

事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧

（1)硅胶：硅胶是硅酸的部分脱水后的产物，其成分是SiO2·xH2O，又叫缩水硅酸。柱色谱用硅胶一般不含粘合剂。

适用范围：非极性和极性化合物，适用于芳香油、萜类、甾体、、甙、蒽醌类、酸性、酚性化合物、磷脂类、脂肪酸、氨基酸，及一系列合成产品如有机金属化合物等。

（2)聚酰胺：色谱用聚酰胺主要有锦纶6（聚己内酰胺)和锦纶66（聚己二酰己二胺)两种，分子量一般在16000-20000，其亲水性和亲脂性均较好，因此既可分离水溶性成份，也可分离脂溶性成分。

可溶于浓盐酸、甲酸及热的、甲酰胺和二甲酰胺中；微溶于和等；不溶于醇、、、、苯等；对碱稳定，树脂柱生产厂家，对强酸可水解。

层析柱详细的操作方法是怎样的？

洗脱

以一定比例的一为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2~3KG/C。按每份500ML收集，TLC检识展开剂一氯(2:8)，显色剂5%香草醛乙醇液

至洗脱相同流份合并，树脂柱厂家供应，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加人适量热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。

层析柱再生、平衡

有效成分经TLC检识全部流出后，用纯5000ML再生，一(5:95)平衡后，树脂柱厂家，可再次上样，反复使用(使用次数随原料不同而异，一般可连续使用2-6个月以上)。