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层析的原理

在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。

层析的原理离子交换层析 离子交换层析是在以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂是由基质、电荷基团和反离子构成的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。如果样品与硅胶的吸附比较强的话 ，就不容易流出 ，层析柱价格，这时可以采用氧化铝作固定相。柱层析后的淋洗液 ，由于使用了较多的溶剂 ，必须进行浓缩 ，如果待测物具有一定的挥发性 ，使用常压挥发溶剂 ，层析柱生产厂家，否则易导致检测结果偏低。

柱层析技术上样用少量的溶剂溶解样品加样 ，层析柱厂家，加完后将底端的活塞打开 ，辽宁层析柱，待溶剂层下降至石英砂面时 ，再加少量的低极性溶剂 ，然后再打开活塞 ，如此两三次 ，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂 ，一开始不要加压 ，等溶解样品的溶剂和样品层有一段距离 (2～4 cm) ，再加压 ，这样避免了溶剂 (如等 )夹带样品快速下行。很多样品在上柱前粘性较大 ，上样后在柱上又会析出 ，这一般都是比较大量的样品才会出现 ，是因为填料对样品的吸附饱和所致。有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱 ，这样就必须用干法上柱了。