




程序降温仪,也叫程序冷冻仪,胚胎冷冻仪是实现生物样本低温冻存的关键设备。在常温样本需要向液氮低温环境转移时,可以介导生物样本的降温过程。广泛应用在移植、脐血冻存、眼、心脏瓣膜样品冻存过程中,新疆程序降温仪,降温速率是影响细胞复苏活性的关键因素:过快/过慢都会对细胞造成损伤以致影响复苏活性。降温速度过快时,细胞内的水迅速结晶,全自动程序降温仪,冰晶会对细胞造成内部损伤;如果降温速度过慢,细胞外的水先结冰,会在细胞内外产生渗透压,会造成细胞脱水,降低细胞复苏率。、皮肤等***的低温保存等领域,并正在向低温材料学科和农牧领域扩展。

快速降温保存,快速程序降温仪,即玻璃化方法就是用高浓度的冷冻稀释液,以极快的速率降温,使溶液内没有足够的时间形成冰晶核就直接转变成无形态的玻璃样固体的过程。此方法的优点是不用的程序控制降温仪,操作简便、快速,减轻损伤,但是由于在降温过程中需要加入大量的冷冻保护剂,高达40-60%v/v,这些冷冻保护剂往往存在一定毒性会内部细胞,同时由于玻璃化过程中为了确保整个生物样品的内部和外部均能实现快速降温,液氮程序降温仪,需要减少样品的尺寸、以及增加和外界超低温环境(比如液氮)的接触面积。因此这种暂时只适用于小尺寸、小计量生物样品的保存,仅有ul单位。所以,目前大家还是通常采取慢速降温进行低温保存。

细胞冷冻保存,1. 材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法:(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量,亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温:利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1~-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。

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