




柱层析技术
柱层析技术也称柱色谱技术。一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相,将混合样品加到柱子上后用特别的溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据混合物中各组分在固定向和流动相中的分配系数不同经过多次反复分配,将不同组分逐一分离。
根据填充基质和样品分配交换原理不同,离子交换层析,凝胶过滤层析和亲和层析是三种分离混合物的经典层析技术。
柱层析分离净化的实验技巧和方法
事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧
事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧常用吸附剂的种类:氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙(镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。几种常见吸附剂的特性(1)氧化铝:市售层析用氧化铝有碱性、酸性2类,层析柱生产商,粒度规格大多为100-150目。碱性氧化铝(pH9—10):适用于碱性物质(如胺、)和对酸敏感的样品(如缩醛、糖苷等),也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、***A和K等的***等不良副反应。所以,这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。酸性氧化铝(pH3.5—4.5):适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等以及色素和醛类化合物的分离。中性氧化铝(pH7—7.5):适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离,也可以用来分离弱的有机酸和碱等。
蛋白层析柱维护过程具体操作介绍及应用领域
脱开所述转接器组件与所述管;
利用所述驱动系统将所述转接器组件提升到所述管的上方,层析柱,以在所述转接器组件和所述管之间提供用于接近的间隙;
将导引元件附接到所述管上;
在不接近所述柱的内部的情况下,松开所述床支承件与所述分配器和所述背垫板;
借助于所述导引元件,在不接近所述柱的内部的情况下,从所述柱上移除所述床支承件;
对所述柱和/或所述床支承件和/或所述一个或多个密封件进行维护;
使所述床支承件返回到所述柱上,层析柱厂家,并且在不接近所述柱的内部的情况下,将所述床支承件和所述背垫板紧固到所述分配器上)从所述管上释放所述导引元件)将所述转接器组件降低到所述管内的操作位置,并且将所述转接器组件重新连接到所述管上。
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