点不能点得太浓，层析柱价格，否则容易重叠，不易判断，因为如果两个点相近的话，层析柱，一浓就变成一个点了。第三、板上点的展开的清晰程度和溶剂的极性和物质在该溶剂中的溶解性有关，只有两者比较合适才能有一个交好的分离效果。
选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯< 蛋白层析柱操作流程 1.吸附：吸附操作自上而下（或自下而上）通液，可采用不同流速，以选取适宜条件。流出液每隔一段时间取样检测，达泄漏点停止吸附，或多柱串联达饱和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物，该过程应控制料液的速度及吸附量，大孔树脂应完全浸泡在料液里，以提高吸附效果和运行稳定性。 2.解吸和再生：解吸操作自上而下（或自下而上）通解吸剂，单柱吸附时，层析柱生产厂家，解吸与吸附操作对流为佳。解吸剂沸点要低以便回收处理。 层析柱的高径比如何影响树脂分离效果 分族分离时用短柱，一般凝胶柱长20-30厘米，柱高与直径的比较5:1─10:1，凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。 分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1，常用凝胶柱有50×25厘米，10×25厘米。层析柱滤板下的死体积应尽可能的小，如果支掌滤板下的死体积大，被分离组分之间重新混合的可能性就大，其结果是影响洗脱峰形，出现拖尾出象，降低分辩力。在分离时，死体积不能超过总床体积的1/1000。
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