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蛋白层析柱操作流程

1.吸附：吸附操作自上而下（或自下而上）通液，可采用不同流速，以选取适宜条件。流出液每隔一段时间取样检测，达泄漏点停止吸附，或多柱串联达饱和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物，树脂柱多少钱，该过程应控制料液的速度及吸附量，大孔树脂应完全浸泡在料液里，以提高吸附效果和运行稳定性。

2.解吸和再生：解吸操作自上而下（或自下而上）通解吸剂，单柱吸附时，解吸与吸附操作对流为佳。解吸剂沸点要低以便回收处理。

柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。这里要指出的一点是：TLC的作用除了跟踪反应进程，检测***和原料纯度外，一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。

上样完毕后，接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同，即使两者使用的硅胶都相同，但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时，也显得极性偏大，所以要稀释一倍，但又不能稀释太多，否则成了靠扩散作用来分离，树脂柱生产厂家，效果也不会好。

接下来谈TLC，需要切记的是：

、某种样品在这种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时，多尝试几种比例不同，成分不同的展开剂。展开剂的极性太小，点分不开，树脂柱供应，极性太大，也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右

层析柱有什么作用呢

层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。

柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时，发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程，吸附力较强的组分，移动的距离小，树脂柱，后出柱；吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。