




层析柱详细的操作方法是怎样的?
洗脱
以一定比例的一为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~3KG/C。按每份500ML收集,TLC检识展开剂一氯(2:8),显色剂5%香草醛乙醇液
至洗脱相同流份合并,阴阳树脂柱,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加人适量热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。
层析柱再生、平衡
有效成分经TLC检识全部流出后,用纯5000ML再生,一(5:95)平衡后,可再次上样,反复使用(使用次数随原料不同而异,阴阳树脂柱多少钱,一般可连续使用2-6个月以上)。
层析柱的直径大小不影响分离度
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,阴阳树脂柱生产商,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,阴阳树脂柱厂家,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。
柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。常见的例子是:在柱层析时,由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀(没有填严实),使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花,导致分离效果不好。更常见的例子是:层析柱虽然装得不错,但是由于淋洗剂选择不恰当,结果导致几十毫克产品,用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。分离同样的东西,熟手可能只需要半个小时,而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。由此可见,这两项技术掌握与否,对于提高工作效率,减轻工作量,减少的使用,从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。
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