




层析柱的操作方法介绍
层析柱再生、平衡
有效成分经TLC检识全部流出后,用纯5000ML再生,一(5:95)平衡后,可再次上样,反复使用(使用次数随原料不同而异,一般可连续使用2—6个月以上)。
重结晶
冬凌草甲素结晶析出完全后,减压过滤,然后用少量洗涤(洗涤液保留,作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置,结晶再次析出,待结晶完全后,抽滤,大孔树脂柱生产厂家,用少量乙*洗涤,将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中,大孔树脂柱厂家,35度真空干燥至恒重。密封于瓶中,置干燥器中保存。
薄层层析分析
取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上,以*仿一(8:2)为展开剂进行展开,5% 香草醛乙醇液显色,于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下,冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值,并呈现出同样的蓝绿点,在制备的冬凌草甲素样品中,没有杂质斑痕。
层析柱规格介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,长春大孔树脂柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。
此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,大孔树脂柱生产商,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。
柱层析技术
柱层析技术也称柱色谱技术。一根柱子里先填充不溶性基质形成固定相,将混合样品加到柱子上后用特别的溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据混合物中各组分在固定向和流动相中的分配系数不同经过多次反复分配,将不同组分逐一分离。
根据填充基质和样品分配交换原理不同,离子交换层析,凝胶过滤层析和亲和层析是三种分离混合物的经典层析技术。
柱层析分离净化的实验技巧和方法
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