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柱层析技术

装柱

柱层析色谱柱的填装主要有湿法和干法两种 ，湿法省事 ，一般用淋洗剂溶解样品 ，也可以用、等 ，但溶剂越少越好 ，不然溶剂就成了淋洗剂了。柱子底端的活塞一定不要涂润滑剂 ，大孔树脂柱生产商，否则会被淋洗剂带到淋洗液中 ，可以采用聚四氟乙烯材料的阀门。干法和湿法装柱没什么实质性差别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该有适度的紧密(太密了淋洗剂流速太慢 ) ，并且一定要均匀 ，不然样品就会从一侧斜着流动。同时柱中不能有大气泡 ，大多数情况下有些小气泡没太大的影响 ，因为只要加压气泡就可消失。但是柱子更忌讳的是开裂 ，开裂会影响分离效果 ，甚至报废。

层析柱是凝胶层析技术中的主体

层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外，直径加大，洗脱液体体积增大，样品稀释度大。分离度取决于柱高，大孔树脂柱生产厂家，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度，分离度与柱高的平方根相关，但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞，一般不超过1米。

层析柱的操作方法介绍

层析柱再生、平衡

有效成分经TLC检识全部流出后，用纯5000ML再生，大孔树脂柱厂家，一(5：95)平衡后，可再次上样，反复使用(使用次数随原料不同而异，一般可连续使用2—6个月以上)。

重结晶

冬凌草甲素结晶析出完全后，减压过滤，然后用少量洗涤(洗涤液保留，作下次热溶冬凌草甲素用)。将冬凌草甲素再用适量热溶后放置，结晶再次析出，待结晶完全后，大孔树脂柱，抽滤，用少量乙*洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。

薄层层析分析

取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上，以*仿一(8：2)为展开剂进行展开，5% 香草醛乙醇液显色，于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。