




如何延长高压液相层析柱的使用寿命?
此份报告基于:考察样品未经过滤时层析柱的使用寿命,对比样品过滤后层析柱的使用寿命,进行研究。应当认识到,能否延长层析柱的使用寿命,取决于样品中包含的颗粒;而且,延长层析柱使用寿命的实际效果可能存在差异。
注入包含大量颗粒物质的样品,将会堵塞高压液相层析柱,缩短样品注入装置的使用寿命,对于泵而言,不必要的维护工作大大增加。如果不加以控制颗粒物质进入层析柱,将会提高层析柱的背压,干扰标称的谱带形状,降低塔板数量,从而缩短层析柱的使用寿命,并加大分析结果的解析难度。
柱层析技术
柱层析操作方法的选择
目前 ,柱色谱分离的操作方式 ,主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是简单的分离模式方便、简单 ,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ,树脂柱多少钱,并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ,以及有些易分解的化合物也难以得到 ,树脂柱生产商,而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。加压分离可以加快淋洗剂的流动速度 ,缩短样品的洗脱时间 ,是一种比较好的方法 ,与常压柱类似 ,只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。压力的提供可以是压缩空气 ,双连球或者小气泵等。
柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。这里要指出的一点是:TLC的作用除了跟踪反应进程,检测***和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。
上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,树脂柱厂家,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好。
接下来谈TLC,需要切记的是:
、某种样品在这种展开剂中只显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时,树脂柱,多尝试几种比例不同,成分不同的展开剂。展开剂的极性太小,点分不开,极性太大,也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右
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