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柱层析技术

溶剂的选择

选择一个合适的溶剂系统是柱层析分离的关键。在选用柱层析洗脱剂时首先要考虑三个方面的因素:溶解性 ( Solubil2ity)、亲合性 (Affinity)和分离度 (Res oluti on)。溶剂应选择价廉、安全、环保的 ，可以考虑、、、、和正己烷等等。但正己烷价格较高 ，树脂柱多少钱，很易挥发 ，和与硅胶的吸附是一个放热过程 ，易使柱子产生气泡。其他的溶剂用的相对较少 ，要依不同需要选择。另外值得一提的是 ，由于我们进行的是痕量分析 ，淋洗剂的纯度必须关注 ，一般使用残留级或 HPLC级的 ，如果是分析纯的必须进行精制。同时溶剂在过柱后回收使用 ，一方面环保 ，另一方面也能节省部分经费。

层析柱的操作方法介绍

1.吸附剂的处理及柱子装填

将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，树脂柱厂家，密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5：95)比例泵入溶剂，至溶剂流出止。

2.上样

将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解，泵入中压柱柱头，然后泵入1000RID。

3.洗脱

以一定比例的一为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC检识展开剂一*仿(2：8)，树脂柱，显色剂5%香草醛乙醇液

至洗脱完全，树脂柱生产厂家，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。

层析柱详细的操作方法是怎样的？

取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品溶解后点于同一硅胶G薄层板上，以氯一(8:2)为展开剂进行展开，5%香草醛乙醇液显色，于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。