注意事项
1. 针头大小与动物的种类有关，t 同时针头一定要磨钝。
2. 检查灌注泵的运作情况，一定排出管子的气泡和空气，防止空气栓塞。
3. 经腹腔暴腔，先清楚升主动脉外面的脂肪***和心外膜***。
4. 将针头经左心室插入升主动脉（颜色变白的哦），并用钳子固定。
5. 解开右心耳，同时开启灌注泵。注意，不要随便揭开心脏的其他部位，否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功，尤其。
6. 将 4 度的生理盐水（好已动物的发白为标准，我们实验室的大鼠约用 250ml）和多聚甲醛 (根据所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整个过程均应将动物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。
主动脉狭窄动物模型的临床概述
人类主动脉缩窄可以见于胸主动脉或腹主动脉的任何部位，如升主动脉、主动脉弓、降主动脉、腹主动脉。主动脉缩窄可引起继发性高g血压。一方面，不同部位的主动脉缩窄都会引起不同程度的左心室后负荷增加，并同时出现主动脉缩窄近端的血压升高。另一方面，腹主动脉缩窄，尤其是双shen动脉上腹主动脉缩窄会引起血流减少，从而激j活shen素-血管紧张素系统，引起高g血压。与此类似的机制在各种常用实验动物中同样存在，动物模型实验，因此，通过***造成实验动物主动脉缩窄，不仅可以引起缩窄近端血压升高，而且可以造成高g血压引起的左心室后负荷增加，或形成类似。shen动脉狭窄高g血压的动物模型。
1.3改良多平台睡眠剥夺法
在MMPM 中将 10 只大鼠(具体数目可根据实际需要确定)同时放在装有 14 或 15 个台的水槽中(长 127 cm ，宽 44 cm ，高 45 cm )进行实验，天津动物实验，这样既避免了 SP及M P中单只大鼠与群体隔离的缺点，又保留了 M P 中活动范围增大的特点，因在实验时大鼠多是 3 只或 4 只一笼进行饲养，临床前动物实验，如 1 组实验需 10 只大鼠，可以做动物实验的公司，则需要3笼或 4笼大鼠，考虑到来自不同笼的大鼠放在一起实验也可能造成群体的不稳定，有学者将实验方法进一步改良，将实验所需的 10 只大鼠放在同一只笼中饲养 2 周，实验时再将这些大鼠放在一起同时进行睡眠剥夺实验，这样以克服实验时大鼠群体不稳定的缺点，从而将实验时的不确定因素减至低! 实验研究发现在MMPM中"经采取措施保持大鼠群体稳定性及避免大鼠与群体分离后" 大鼠上腺重量%体重减轻量%中促上腺皮质(A CTH )和上腺皮质酮 (CO RT) 的含量均较M P中为低，提示M M PM 较 M P 具有更低的应激性，是较为理想的REM 剥夺方法。
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