





细胞冻存有哪些注意事项?
细胞培养的传代及日常维持过程中,在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费,而且细胞一旦离开开始原代培养,细胞实验外包公司,它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;细胞储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是的。
细胞冻存的步骤:
配制含 10%DMSO 或甘油、10~20% 小牛的冻存培养液;
取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用 PBS 清洗。
去除 PBS,加入适量胰蛋白酶 (覆盖培养皿表面) 把单层生长的细胞消化下来;
离心 1000rpm,5min;
去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的终密度为 5×106/ml~1×107/ml;
将细胞分装入冻存管中,每管 1~1.5 ml;
在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱 2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,细胞实验外包哪家好,移入液氮容器内。

细胞培养中常见的污染及解决方法
***污染
***污染后,培养基一般清澈,保持原色。细丝可以在显微镜下观察到。,一些***类似于死细胞碎片,但其中许多清晰可见,看起来像珊瑚,阿坝细胞实验,比较容易区分。此外,它们会慢慢长出细细的黑色细丝,因为它们生长得比较慢,不像***那样容易被发现,一旦发现培养基被污染,它们将很难存活。
解决方法:一旦被***污染,果断丢弃,然后对细胞房、CO2 培养箱、器皿和培养基进行消毒。

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