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展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。很多时候，展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到效果。我在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了所有的溶剂用来两两组合后，才找到petroleumether/THF这类不常见的混合溶剂。

一般把两种溶剂混合时，大孔树脂柱，采用性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂，如果有分开的迹象，再调整比例，达到效果，如果没有分开的迹象，是换溶剂。

对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质，在展开剂里在利用TLC跟踪反应时，在点板的时候往往是反应体系的混和溶液点一个点A，每种难挥发的原料各点一个点B，大孔树脂柱多少钱，C， D等等，然后所有的原料和反应体系的混合溶剂再共同点一个混合点X，这些点在板上的位置如图所示： A X B C D

事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧层析柱是层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。不锈钢层析柱根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。选柱子：有玻璃柱和不锈钢层析柱两种，实验室常用玻璃柱。径高比一般在1:5-10。 根据吸附剂用量（体积)确定柱子大小，大孔树脂柱价格，一般吸附剂应填充到柱子体积的1/4-1/5。灌柱子方法柱子可以分为：加压，大孔树脂柱生产商，常压，减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。其他条件相同的时候，常压柱是时间也长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结)，以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长)。加压柱是种比较好的方法，与常压柱类似，只是外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或小气泵。特别在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。

柱层析技术

柱子规格的选择

市场上有各种规格的柱层析分离柱。柱子长了 ，相应的塔板数就高 ，分离就好。目前市场上的柱子 ，其径高比一般在1: 5～10范围 ，在实际使用时 ，填料量一般是样品量的 30～40倍 ，具体的选择要根据样品的性质和含量进行具体分析。如果所需组分和杂质的分离度较大 ，就可以减少填料量 ，使用内径相对较小的柱子 (如 2 cm × 20 cm的柱子 ) ;如果 Rf相差不到 0.1，就要加大柱子 ，增加填料量 ，比如用 3 cm内径的柱子。