




层析柱的操作方法
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例:
1.吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,层析柱厂家,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。
2.上样
将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解,泵入中压柱柱头,然后泵入1000RID。
3.洗脱
以一定比例的一为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC检识展开剂一(2:8),显色剂5%香草醛乙醇液
至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置,层析柱,析出结晶,为冬凌草甲素。
大孔吸附树脂应用过程中,需要注意一些问题
在大孔吸附树脂的应用过程中,也需要注意一些问题:
①储存与运输的过程中,要防止树脂脱水或受冻而被***;
②使用前应按照一定的步骤进行预处理,以去除树脂内可能含有的分散剂、致孔剂、惰性溶剂等化学残留;
③在树脂装柱运行后,可能有堵塞发生,造成的原因主要有悬浮物污堵、生物
堵塞、铁及镁污染和***钙沉淀,应采用相应的处理措施将堵塞物去除;
④脱附工艺中会产生碱性脱附液,需要进一步处理。
上样
1、干法上样
①、制样:将物料用极性较大的且洗脱剂中需用的溶剂溶解成浆状(或溶液状),再加入硅藻土(或硅胶)充分混合,晾干;再粉碎成粉未状,混合均匀。
②、将制好的样品,置于预柱中或层析柱上端硅胶床层的上面,层析柱价格,铺平;再放上滤布(网),筛板,层析柱供应,再按图装好柱上端封头。
2、 湿法上样
①、制样:将物料用极性比硅胶小的溶剂(例如:、乙醇-混合液、、等)溶解或制成浆状,直接倒在层析柱硅胶床层的上面,铺平即可(如果上样液多,也可以用泵(或氮气)慢慢打(压)入柱中)。
②、同上,放上滤布(网)筛板,装好上封头。
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