2、贴壁细胞如何分离下来?
如果把贴壁的细胞洗下来常用的办法就是加入胰蛋白酶消化，37°C环境下放置3~5min便可，但是残留培养瓶内的胰蛋白酶对细胞***性作用，所以都会添加低浓度的以中和胰蛋白酶的。用超声的办法也可以把细胞分离下来，但是要注意超声的频率不能太大，而且细胞很娇嫩，细胞贴壁处理方式，超声会导致细胞的。这是由细胞的性质特点决定的。
悬浮细胞:细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，这类细胞称为悬浮细胞。如淋巴细胞。贴壁细胞:在动物细胞培养过程中，必须有可以贴附的支持物表面，其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。兼性贴壁细胞:有些细胞并不严格地依赖支持物，它们既可以贴附于支持物表面生长，但在一定条件下，细胞贴壁处理，它们还可以在培养基中呈悬浮状态良好地生长，这类细胞称之为兼性贴璧细胞。
培养细胞在木贴附于底物之前一般均似球体样;当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形 态，呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一-种需要能量的过程，细胞贴壁处理目的，一般认为与电荷有关。据资料记载，细胞贴壁处理方法，37°C时在2min内细胞之间即可形成键，该键可对0. 01%胰蛋白酶起作用且仅发生于细胞之间，而细胞与底物之间则无; 8 min后才有稳定的键形成。
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