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考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么
在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，着色剂亮蓝生产厂家，导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色，该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford***混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，衡阳着色剂亮蓝，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，da光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。
该法是1976年Bradford建立，***配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，xaio可测2.5μg/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。
性状描述带金属光泽的深紫至青铜色颗粒或粉末。无臭。耐光性及耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱稳定。易溶于水（18.7g/100ml，21℃），0.05%中性水溶液呈清澈蓝色。弱酸时呈青色，强酸时呈***，仅在煮沸并加碱时呈紫色。溶于乙醇（1.5g/100ml，95%乙醇溶液，21℃）。溶于甘油和丙二醇。与柠檬黄可配成绿***素。应 用 情 况国内应用情况无国外应用情况无其 他 信 息类别食用色素（着色剂）制法由邻苯醛磺酸与α-（N-氨基）间磺酸的缩合物用重络酸钠或二氧化铅氧化成色素，中和后用***钠盐析，着色剂亮蓝厂家，再经精制而得。可转化为铝色淀。用途食用蓝***素。可用于糕点、清凉饮料、西式酒等，因其色度极强，通常与其他色素配合使用。在食品中的使用量仅1～20万左右。代谢情况无 <毒理学性质ADI0～12.5mg/kg（FAO/WHO，着色剂亮蓝批发，1994）。LD50 >2000mg/kg
该色素稳定性优良，可安全地用于食品、饮料、化妆品、饲料、玩具、食品包装材料等的着色。
【保质期】5年
【使用说明】用户在使用本品前应仔细阅读GB2760《食品添加剂使用卫生标准》，各个单色品种的使用范围和使用量会有所不同，该标准详细规定了各个品种食品着色剂的使用范围和限制使用量
【使用范围】可用于果汁（味）饮料、碳酸饮料、配置酒、糖果、糕点上彩装、红绿丝等食品的着色
【使用量】见瓶体。
【复合着色剂的使用】根据需要，可将本品与本公司生产的其他色泽的着色剂按适当比例配制各种不同的颜色。
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