




半功倍的不锈钢层析柱使用技巧(1)固定相一定要添加结实;(2)一定要用较多的溶剂“走柱子”,直到柱子的下端不再发烫, ***到室温后再撤去压力。无论使用哪种方法装柱,后都要求所装的柱子结实、匀称、无气泡。上样的技巧上样也有湿法和干法之分:湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用、 等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,黑龙江大孔树脂柱,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要***硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,大孔树脂柱厂家,再充分地吸附后将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂, 而不会冲坏硅胶表面。很多样品在上柱前是粘乎乎的, 一般没关系。有的时候上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会出现, 是因为硅胶对样品的吸附饱和, 而样品本身又是比较好的固体才会析出, 这就需要先重结晶样品, 得到大部分的产品后剩余的产品再柱分。
层析柱的操作方法
层析柱的操作方法
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例:
1.吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,大孔树脂柱供应,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,大孔树脂柱生产商,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。
2.上样
将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解,泵入中压柱柱头,然后泵入1000RID。
3.洗脱
以一定比例的一为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC检识展开剂一(2:8),显色剂5%香草醛乙醇液
至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。
大孔吸附树脂的分类
根据树脂极性的不同,大孔吸附树脂可以分为非极性、中极性、极性和强极性四类.
非极性吸附树脂是由偶极距很小的单体聚合而成,不含任何功能基团,表面的疏水性较强,可通过与有机物的疏水部分作用而吸附溶液中的有机物,适合于从极性溶剂(如水)中吸附非极性物质。
中极性吸附树脂含有酯基,其表面兼有疏水和亲水部分,既可从极性溶剂中吸附非极性物质,也可从非极性溶剂中吸附极性物质。
极性和强极性吸附树脂一般通过静电作用吸附极性物质。
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