脓毒症模型
脓毒症模型方法及原理
一般构建脓毒症模型有多种方式，例如***攻击、内毒su攻击、腹膜炎攻击等，针对小鼠较为经典的方法为盲肠jie扎穿刺（CLP）。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种，主要是通过***方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染，从而模拟脓毒症的发生和发展。
实验方法
Step1：常规方法ma醉小鼠，剔除腹部毛发，酒精消毒
Step2：腹部正中开口，逐层打开皮肤和腹膜，暴露盲肠
Step3：使用锐器刺穿盲肠尾部1/2位置，挤出内容物
Step4：放置引流物，时盲肠内容物可持续流出
Step5：逐层缝合皮肤，碘伏消毒，将小鼠放回笼内饲养
前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法：分别采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受体抑zhi剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑zhi剂AH23848 处理的NR8383 细胞作为各实验组，选择未经PGE2以及其特异性受体抑zhi剂处理的NR8383 细胞作为对照组，采用Western blot 和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及mRNA的表达水平；收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激1HUVECs，运用TRANSWELL 小室、Matrigel 胶细胞成管实验等实验方法，观察PGE2调控巨噬细胞对HUVEC 迁移效应和成管能力的影响。
结果：随着NR8383 细胞培养液中加入PGE2浓度增gao，其 VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）；0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积，形成小管面积随着PGE2处理浓度的增加而增加（P<0.05）；HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强，裸鼠动物实验外包，HUVECs趋化的数量显著升高（P<0.05）；研究发现PGE2特异性的EP2/EP4 受体拮抗剂AH6809/AH23848，可以显著***PGE2 增强NR8383 细胞内VEGF mRNAs 表达的作用并且也显著***PGE2 增强 NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应（P<0.05）。
实验动物大、小鼠的采血方法
1、动物实验中剪尾采血：需血量少时可用此方法。将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约5mm，从尾根部向尾端部，血即从断端流出。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，常州动物实验外包，止血。如将动物取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml，大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。
2、动物实验中摘眼球采血：此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物，动物实验课题外包找哪家，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。
大鼠后眼框静脉丛取血方法
4、动物实验中颈静脉或颈动脉采血：将鼠，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离***，用即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。
5、断头采血：操作者左手拇指和食指握住鼠颈部，头朝下，用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部，提起动物，血液即可流入准备好的容器中。
6、心脏采血：将动物，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺，血液借心脏跳动的力量进入。亦可在动物后，切开动物胸腔，直视心脏内抽血或剪破心脏，直接用、吸管等吸血。
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