




MTT检测
MTT 是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活xi胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,293t细胞,而死细胞无此功能。二jia基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免yi检测仪在 570nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映活xi胞数量。

细胞培养中常见的污染及解决方法
黑点污染
黑色的游动点能穿透滤膜并在空气中扩散。它们在低倍镜下显示为黑色圆点,在高倍镜下显示为可移动的黑点。培养液也不浑浊,一般影响较小,因此细胞仍可使用。通常,黑点污染后,细胞生长良好,动物细胞培养,运动物体无明显增加,培养基的颜色和透明度无明显变化。在同一批培养的细胞中也可以发现类似的现象。
解决方法:黑点对细胞生长状态没有明显影响,细胞增殖后会自然消失,因此除了置换外,无需特殊处理。如果细胞可能被小的运动点污染,建议增加培养皿细胞密度,榆林细胞,以提高细胞存活率。
细胞实验介绍——细胞运动能力检测:
细胞划痕实验是体外模拟细胞迁移能力和修复能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中,沿着中线使用移液器头或者其他硬物划1-3条平行的直线,去除中线的细胞,细胞在0h、12h、24h后,观察细胞往中线迁移情况,流式细胞检测结果分析,判断细胞迁移能力。
一般流程:细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照
细胞迁移和侵袭实验是体外模拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚碳酸酯膜transwell小室放入培养板中,将细胞接种于小室中,利用培养液成分的差异诱导细胞运动,检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。
一般流程:transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照
结果示例:
图 A 细胞划痕实验图;B,C 细胞迁移和侵袭实验图
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