树脂柱生产商-龙鼎世纪(在线咨询)-树脂柱

上样

1、干法上样

①、制样：将物料用极性较大的且洗脱剂中需用的溶剂溶解成浆状（或溶液状），再加入硅藻土（或硅胶）充分混合，晾干；再粉碎成粉未状，混合均匀。

②、将制好的样品，置于预柱中或层析柱上端硅胶床层的上面，树脂柱供应，铺平；再放上滤布（网），筛板，再按图装好柱上端封头。

2、 湿法上样

①、制样：将物料用极性比硅胶小的溶剂（例如：、乙醇-混合液、、等）溶解或制成浆状，直接倒在层析柱硅胶床层的上面，铺平即可（如果上样液多，也可以用泵（或氮气）慢慢打（压）入柱中）。

②、同上，放上滤布（网）筛板，装好上封头。

层析柱装柱步骤流程

1.计算每厘米柱床高度填料的数量；

2.选择合适的配件和末端筛网，选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料***；

3.选择装柱流速

首先：拍排泡

第二：调水平

第三：匀浆

第四：装柱

第五： 绘制压力/流速曲线，装柱流速为大流速的70%-100%。

柱效检测

柱效主要取决于装柱质量。如果是离子交换或亲和层析填料，则不能使用有色物质，树脂柱厂家，如蓝色葡聚糖。表征柱效的两个指标是理论板当量高度（HETP）和对称因子As，使用N***或通过测定UV吸收或电导率进行计算。

使用N***溶液进行测定，优点样品是易得、安全，缺点是可能与填料发生反应，特别是离子交换树脂，因此影响测定结果。使用进行测定，其不与层析填料发生反应，并且可通过检测280 nm处的紫外吸收进行测定，并且，测定缓冲液的浓度可提高至10倍。

平衡柱子

即用洗脱剂中极性小的溶剂（例如、、等）用计量泵（或氮气）打入（压入）层析柱上端。此溶剂因极性小于硅胶，树脂柱，不会把吸附在硅胶上端面的物料中有用物质洗脱下来，而只能将物料中的极性很小的油脂等杂质洗下。另外，此过程还可以将柱中硅胶中的大量空气往下赶出柱外。这个过程俗称“平衡”柱子或“平衡”吸附剂。可使硅胶被溶剂浸润，且排出空气，有利于续后的洗脱分离过程。

当平衡用的溶剂从柱下流出后，可以停止此过程，改用洗脱剂洗脱分离过程；平衡过程也可以再理行一段时间，将柱子中的空气多排出一些，但溶剂耗量也会增加。