




保温的方式除有的ELISA仪器附有特1制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,小鼠elisa试剂盒,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,最后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。为避免酶标板底部受水汽或磨损导致的读数误差,一般采用鼓风恒温箱保温,这个过程必须在酶标板上方贴封纸,以免蒸发。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,elisa试剂盒,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,elisa试剂盒厂家,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证时间精1确,一个人一次不宜多于两块板同时操作、测定。
5. 除去PBS液,每张切片加1滴或50μl 即用型MaxVisionTM 试剂或SP试剂(采用武汉默沙克效果更佳),牛elisa试剂盒,室温下孵育10-15分钟。PBS冲洗3次,每次3分钟。
6. 除去PBS液,每张切片加2滴或100μl新鲜配制的DAB或AEC溶液,显微镜下观察3-5分钟(DAB)或37℃环境下10-30分钟(AEC)。
7. 自来水冲洗,苏1木素复染10分钟,PBS或自来水冲洗返蓝。如果用DAB显色,则切片经过梯度酒精脱水干燥,二甲本透明,步骤同H-E染色,中性树胶封固;如果用AEC显色,则切片不能经酒精脱水,而直接用水性封片1剂封片。
13、检测前,要打开酶1标仪,使之稳定10分钟以上。
14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
15、待检样品要澄清,否则会影响结果。
16、温浴时间应遵守试剂盒规定。
17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
二、下面所提到的是针对我公司的ELISA产品会出现的问题及解决办法
1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶标记物。
解决办法:请按照操作步骤进行。
b.原因:试剂盒内容物未能充分回。
解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。
c.原因:室温太低。
解决办法:若室温太低(lt;19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。
d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。
解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。
e.原因:试剂盒已过有效期限。
解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。
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