吉林原位杂交-武汉思特进科技公司-原位杂交技术

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，荧光原位杂交，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

根据异源单链核酸分子间因结构互***生共价键结合，植物***原位杂交，能形成互补杂合双链，而进行分子遗传学研究的一种技术。双链核酸分子加热至80～100℃时，碱基对之间的氢键断开，形成两条单链，这一过程叫作核酸的变性作用或解链。变性的核酸分子慢慢冷却，吉林原位杂交，互补的碱基对之间又会重新形成双链分子，这一过程叫作核酸的复性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的环境中也会变性，当条件适合时又可复性。核酸分子杂交技术是基于核酸变性与复性的原理。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，原位杂交技术，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是20世纪80年代末在性原位杂交技术基础上发展起来的一种非性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术，是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法荧光原位杂交技术问世于20世纪70年代后期。1977年，荧光标记的被应用于识别特异性DNA—RNA杂交I I。1980年，J.G.Baunlan等将应用化学偶联的方法将荧光素结合到RNA探针上用于直接快速的特异性靶序列检测。荧光原位杂交技术技术原理是将荧光素直接或间接标记的核酸探针[或生物素、、dinit rophenyl（I）NP）、aminoacetylAAFfluorine（AAF）等标记的核酸探针与待测样本中的核酸序列按照碱基互补配对的原则进行杂交，经洗涤后直接在荧光显微镜下观察。

荧光原位杂交技术是一种重要的非性原位杂交技术，原理是利用报告分子（如生物素、等）标记核酸探针，然后将探针与染色体或DNA纤维切片上的靶DNA杂交，若两者同源互补，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。此时可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的化学反应，经荧光检测体系在镜下对待DNA进行定性、定量或相对***分析。 [1]

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对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落（100-200）进行筛选时，可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张纤维素滤膜上。经培养一段时间后，对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。 用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上，再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种（或打点）。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后，在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。