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心肌细胞首先合成108个氨基酸的BNP原,称之为proBNP(BNP前体)。在受到心肌细胞的刺激后(例如,心肌细胞拉伸),proBNP在蛋白酶作用下列解为NT-proBNP(氨基末端- proBNP或N端-proBNP)和生物活性激1素BNP。两种多肽都释放进入血循环。三、代测的优点和缺点1、优点:代测由负责研发该生化指标***盒的***亲自测定,确保短期内获得可靠的数据,避免了客户因为缺乏测定经验和技巧造成的***和样品浪费。两者来源相同并且等摩尔分泌。
BNP与NT-proBNP的不同点主要有如下几点:
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 细胞裂解液
1) 吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2) 收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑1制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。