




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
三.实验材料
仪器设备:1.酒精灯、三角烧瓶,培养皿;2.镊子、剪刀、剖针;3.双筒解剖显微镜;4.光照培养箱或温室;
材料烟1草无菌苗、豌豆幼苗。
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(1)MS培养基,植物激1素:NAA、6-BA等;
(2)饱和漂液(次氯1酸钠);
(3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;
(4)无菌水
四.实验步骤
豌豆苗的茎尖培养
⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株,简取1厘米左右的茎尖,浸入70%的酒精中1分钟,再浸入饱和次氯1酸钠溶液中消毒15分钟,(此步以后要求无菌)用无菌水中冲洗5次,在灭菌的滤纸上吸干水分,放入灭菌的培养皿中。
6.酶***测定
酶***测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。这种固相酶***测定方法在1971年***1初建立时称为酶联***吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联***吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。
4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗1体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗1体的来源为抗血1清,包被和酶标用的抗1体***1好分别取自不同种属的动物。如应用单克1隆抗1体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。它与ANP均属于心脏利钠肽类,由于它们的发现使人们认识到心脏也是一种内1分泌器1官。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗1体一起保温反应,作一步检测。