elisa***盒***-默沙克(图)

武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。

ELISA***盒操作步骤

1. 加样：标准品设定5个浓度点10个孔，每个浓度设定平行孔，加入50微升不同浓度的标准品，空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水（空白对照孔不加样品及酶标***，其余各步操作相同）、待测样品孔，在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品***终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

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1．取材

切取的***块不宜太大，以利于固定剂穿透，通常以6mm×6mm×5mm为宜。

注意事项：

（1）取材动作要迅速，不宜作太久的拖延以免***细胞的成分、结构等发生变化。

（2）切片材料应根据需要观察的部位进行选，尽可能不要损伤所需要的部分。

2．固定

将切好的***用生理盐水***洗3次，立即投入10%中性1福尔1马林固定液或4%多聚甲醛中固定，固定36小时。

注意事项：

（1）一般固定液，都以新配为好，elisa***盒***，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下，以免引起化学变化，失去固定作用。

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3、 细胞培养上清

取细胞培养上清到离心管，1000×g离心20min，除去细胞碎片及杂质，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

4、 细胞裂解液

1） 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。

2） 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。

3） 加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑1制剂）重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。