




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
1.一次ELISA实验需要多长时间?
双抗1体夹心ELISA法一次实验需要3.5-4小时,竞争ELISA法一次实验需要2-2.5小时。
2.血1清样本如何处理?
全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 血浆样本如何处理?
建议选择EDTA或者柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
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6.酶***测定
酶***测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶***测定方法在1971年***1初建立时称为酶联***吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联***吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。
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机体被微生物感1染后,先产生IgM抗1体,然后产生IgG抗1体。经过一段时间,酶联******盒代测,IgM抗1体量逐渐减少而消失,而IgG抗1体可长期存在,在***痊愈后可持续数年之久。
IgM抗1体一般为保护性抗1体具有***性。因此IgM抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的临床诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中IgG抗1体和IgM抗1体出现的时间和水平。
1.3 抗原抗1体反应
1.3.1 可逆性
抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
Ag Ab→Ag·Ab
抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示:
K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab]
Ag·Ab的解离程度与K值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中,特异性的IgG抗1体仅占总IgG中的极1小部分。用亲和层析法提取的特异性抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于***测定中可得到更好的效果。
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