臭氧对空气中的微生物有明显地杀灭作用，采用30mg/m3浓度的臭氧，作用15分钟，对自然菌的杀灭率达到90%以上。用臭氧消毒空气，必须是在人不在的条件下，消毒后至少过30分钟才能进入。可用于***室，病房，无菌室等场所的空气消毒。臭氧对表面上污染的微生物有杀灭作用，但作用缓慢，一般要求60mg/m3，相对湿度≥70%，作用60-120分钟才能达到消毒效果。对于大多数非芽孢微生物，在室温、450MPa压力下的灭菌效果良好。臭氧对人***，***规定大气中允许浓度为0.2mg/m3，故消毒必须在无人条件下进行。臭氧为强氧化剂，对多种物品有损坏，浓度越高对物品损坏越重，可使铜片出现绿色锈斑、橡胶老化，变色，弹性减低，以致变脆、断裂，使织物漂白褪色等。使用时应注意。
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间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。就一般灭菌方法来说，应根据微生物的种类、污染状况、被污染物品的性质与状态，对下述灭菌方法可单独或合并使用。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的***，而可将间歇培养期间萌发的孢子，从而达到彻底灭菌的目的。
紫外线灭菌法，是利用照射紫外线杀灭微生物的一种方法。本办法主要用于玻璃制品、金属制品、橡胶制品、塑料制品和纤维制品等，还可用于设施、设备、水或品等，这些物品应对紫外线有良好的耐受性，通常，一般应用200—300nm的紫外线。3、高频灭菌法，是直接用照射高频发热杀灭微生物的一种方法。D值是指在一定温度下，杀灭90%微生物（或残存率为10%）所需的灭菌时间。本办法主要用于水、培养基、试验液体和液状的等耐受高频照射的物品。通常采用915或2450兆周的频率。
