武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。【主要组成成份】底物显色液A液：柠檬酸，30%H2O2底物显色液B液（避光保存）：EDTA-Na，柠檬酸，甘油，TMB。目前可提供各种抗1体、免1疫学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。
当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是***、***、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室***消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。（2）在更换高一级的脱水剂时，***1好不要移动材料以免损坏，可用吸管吸出器皿中的脱水剂，再用吸水吸尽器皿内剩余液，然后于皿中加入高一级脱水剂。 高浓度的抗1生素和抗霉菌素可能对一些细胞系***性，因而，做剂量反应实验确定抗1生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗1生素如两1性霉1素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是我司推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤：
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品，服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
1、染色过强 原因 解决办法 抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长 降低抗1体滴度（一般指浓缩性抗1体）抗1体孵育时间：室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 显色时间过长或 DAB 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下观察为准 2、非特异性背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 ***中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭，孵育时间延长 ***中含内源性生物素 正常非***动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间
2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标***50μl，空白孔除外。
6. 温育：操作同2。
7. 洗涤：操作同4。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B050μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转***）。
10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。