




武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。总的来说,因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。目前可提供各种抗1体、免1疫学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免1疫学等生命科学领域。
1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2. 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如,两1性霉1素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3. 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4. 确定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2~3代。
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、***学***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物学***等多用途多属种的高品质产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、***学等生命科学领域。
【预期用途】
适用于酶联***反应中的显色阶段。
【检验原理】
原理是应用酶联***学基本原理——当标记在抗1体或抗原上的酶与显色液中的TMB、H2O2等反应,加入终止液后溶液由无色变成***,***深浅反应ELISA体系中抗原抗1体结合的多少,从而判断某种抗原或抗1体的多少。2***适比例在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物(沉淀)的量见图1-4。在通过酶1标仪测读吸光值,判断***反应的程度。
【主要组成成份】
底物显色液A液:柠檬酸,30%H2O2
底物显色液B液(避光保存):EDTA-Na,柠檬酸,甘油 ,TMB。
6.酶***测定
酶***测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相E0IA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相E0IA在临床检验中较少应用。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗1体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的生物素化抗1体愈少,***后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。非均相E0IA需***行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶***测定方法在1971年***1初建立时称为酶联***吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联***吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。